Метод амплификации юнга: Глава 9.Метод ассоциирования и амплификация — КиберПедия

19. Метод амплификации.

Юнг использовал метод, названный им методом амплификации (усиления, расширения). По его мнению, хотя свободные ассоциации, в конечном счете «всегда приводят к комплексу, мы не можем быть уверены, что именно данный комплекс и составляет настоящий смысл сна… Конечно, мы всегда можем так или иначе добраться до наших комплексов, поскольку они являются полюсами притяжения для всего остального психического материала». Но бывает и так, что сон указывает на нечто прямо противоположное содержанию комплекса: с одной стороны, на естественную функцию, которая могла бы избавить индивида от его комплекса, с другой же стороны — на путь, который мог бы избрать этот индивид.

Метод амплификации отличается от метода свободных ассоциаций также и в том отношении, что источником ассоциаций здесь, наряду с пациентом или лицом, рассказывающим собственный сон, является сам аналитик. Аналогии, предлагаемые аналитиком, часто определяют направленность ассоциаций, возникающих у пациента.

При всем своем богатстве и разнообразии такие аналогии и образы всегда родственны содержанию сна; что же касается свободных ассоциаций, то в нашем распоряжении нет никаких способов контролировать их поток и предотвращать его «растекание» в стороны, весьма далекие от содержания сна.

Итак, амплификация — это ограниченный, контролируемый и направляемый ассоциативный процесс, который так или иначе вращается вокруг смыслового ядра сновидения и тем самым помогает аналитику нащупать это ядро. «Амплификация приносит пользу в тех случаях, когда приходится иметь дело со смутными, неясными переживаниями, которые можно понять только поместив их в определенный психологический контекст (что в свою очередь, требует их расширения, увеличения их объема). Именно поэтому, толкуя сны в духе аналитической психологии, мы прибегаем к амплификации: ведь сон — это очень тонкий намек, который чрезвычайно сложно понять, не обогатив его определенным набором ассоциаций и аналогий».

Амплификацию следует применять к любым элементам сновидения — если только мы хотим сформировать для себя некую общую картину, на основании которой можно было бы расшифровать скрытый «смысл». В рамках юнговского метода амплификации различные мотивы сна «обрастают» родственными образами, символами, легендами, мифами и т. п., в результате чего постепенно выявляются их самые различные аспекты и возможные смыслы; в конечном счете, это приводит к полному прояснению их значения. Полученные смысловые элементы связываются друг с другом, и в итоге формируется непрерывная цепь мотивов сна, а сам сон, как некое единство, становится доступен окончательной верификации.

Детские страхи постразводного периода могут проявляться в разнообразных симптомах. Родители, и прежде всего тот из них, с кем живет ребенок (чаще всего это мать), должны в это время проявлять нео­быкновенно много

внимания и терпения по отноше­нию к этим симптомам. Дети должны иметь возможность регрессиро­вать, для того чтобы суметь восстановить то дове­рие, которое в ходе развода оказалось потерянным. К проявлениям регрессий относится усиленная за­висимость, потребность контролировать мать, склонность к слезам и капризы, это может быть так­же ночное недержание, приступы ярости и т. д. Следует много разговаривать, ежедневно, еже­часно, об одном и том же, отвечая на вопросы: «Поче­му вы больше не вместе?» и «Объясни мне это еще раз!» и т. д. Терпеливо и с любовью следует снова и снова уверять детей, что они все еще любимы и все­гда будут любимы, что они и дальше будут видеть па­пу (если это действительно так), что сами они ни в ко­ем случае не виноваты в разводе и т. д. Речь идет не только об ответах на задаваемые вопросы. Многие де­ти вообще не задают вопросов. Родители со своей сто­роны должны форсировать эти разговоры, особенно тогда, когда состояние ребенка явно выдает его пере­живания.

Итак, родители должны сильно редуцировать свои обычные ожидания, которые они предъявляют к де­тям. Конечно, это не значит, что все следует пустить на самотек и отменить всякие рамки.

Для матери развод часто означает снижение материального уровня, нередко ведет к потере социальных отношений, она остро пережи­вает свою несчастную любовь и несложившиеся от­ношения. Сюда добавляются напряжение в отноше­ниях с бывшим мужем, квартирный вопрос; матери, которые до этого работали полдня, теперь должны взять на себя полную нагрузку, в результате для детей времени остается еще меньше.

Некоторые матери после развода переезжают к своим родителям, впа­дая, таким образом, в новую зависимость, что для детей может означать, что мать превратится в своего рода старшую сестру, а бабушка с дедушкой займут место родителей.

Короче говоря, разведенная мать, которая сама страдает из-за развода, ни в чем так остро не нуждает­ся, как в абсолютно послушных, как можно более са­мостоятельных, не очень нуждающихся во внимании и терпении детях. По крайней мере до тех пор, пока сама она не будет в состоянии исполнить ожидания ребенка.

В то же время ребенок нуждается в матери, которая была бы до такой степени самоотверженна, терпелива, заботлива и проникновенна, какой она, собственно, до сих пор еще никогда не была. Именно этот парадокс, по моему мнению, повинен в том, что в это критическое время у детей оказывается отнятой возможность преодоления изначальных и весьма дра­матических переживаний, которые приносит с собой развод.

Первые недели и месяцы после развода — это то время, когда многому еще можно помочь, но на прак­тике именно в этот период страхи детей непрерывно возрастают. Роль этого послеразводного кризиса в дальнейшем развитии ребенка весьма значительна. Если конфликты, а вместе с ними и страхи детей в это время непомерно возрастают, то вскоре дело может дойти до частичного или даже полного срыва системы защиты.

Под системой защиты понимается то пси­хическое равновесие, которое мы бессознательно соз­даем на протяжении всей нашей жизни, чтобы быть в состоянии так или иначе преодолевать свои внутри-психические конфликты.

Амплификация . Предвосхищение. Том 2. Словарь с комментариями

Вт, 11/08/2009 – 15:59 – С.А.Кравченко

Амплификация (от лат. amplificatio – распространение, расширение). Аналитическая техника, разработанная К. Юнгом, которая представляет собой работу со сновидениями в бодрствующем состоянии. Прообразом этого процесса служит стилистическая фигура, состоящая из нанизанных друг на друга синонимических определений, сравнений, образных выражений, с целью усиления выразительности высказывания. Содержание снов осмысливается за счет свободных ассоциаций и через их мифологическое толкование. Происходит сравнение отдельных мотивов сна индивида с аналогичными по смыслу произведениями литературы (саги, мифы), живописи, традиционными символами. Предполагается, что при применении этой техники происходит развитие личности благодаря осознанию той части души, которая была до сих пор скрыта. Расширение сознания индивида и его упорядочивание происходит именно в контексте смыслов сна. Данная техника противоположна методу З. Фрейда «редукции к первичным фигурам»

Метод амплификации

Вместо того, чтобы работать со «свободными ассоциациями», как это принято в психоанализе З.

Фрейда, К.-Г. Юнг использовал метод амплификации (усиления, расширения). По его мнению, хотя свободные ассоциации, в конечном счете «всегда приводят к комплексу, мы не можем быть уверены, что именно данный комплекс и составляет настоящий смысл сна…

Конечно, мы всегда можем так или иначе добраться до наших комплексов, поскольку они являются полюсами притяжения для всего остального психического материала. Но бывает и так, что сон указывает на нечто прямо противоположное содержанию комплекса: с одной стороны, на естественную функцию, которая могла бы избавить индивида от его комплекса, с другой же стороны – на путь, который мог бы избрать этот индивид. В противоположность фрейдовскому методу «редукции к исходному», амплификация является не просто непрерывной, ведущей в прошлое цепочкой ассоциаций, а процессом, благодаря которому содержание сна расширяется и обогащается через привлечение аналогий.

Метод амплификации отличается от метода свободных ассоциаций также и в том отношении, что источником ассоциаций здесь, наряду с пациентом или лицом, рассказывающим собственный сон, является сам аналитик. Аналогии, предлагаемые аналитиком, часто определяют направленность ассоциаций, возникающих у пациента. При всем своем богатстве и разнообразии такие аналогии и образы всегда родственны содержанию сна.

Итак, амплификация – это ограниченный, контролируемый и направляемый ассоциативный процесс, который, так или иначе, вращается вокруг смыслового ядра сновидения и тем самым помогает аналитику нащупать это ядро. «Амплификация приносит пользу в тех случаях, когда приходится иметь дело со смутными, неясными переживаниями, которые можно понять только поместив их в определенный психологический контекст (что в свою очередь, требует их расширения, увеличения их объема). Именно поэтому, толкуя сны в духе аналитической психологии, мы прибегаем к амплификации: ведь сон – это очень тонкий намек, который чрезвычайно сложно понять, не обогатив его определенным набором ассоциаций и аналогий.

Пользуясь методом амплификации, мы выбираем те или иные аналогии не на основе временного совпадения или какого-либо научного, исторически обусловленного критерия, а потому, что их смысловое ядро идентично содержанию исследуемого сна или в каком-то отношении походит на него. Принимая в качестве данности, что все, когда-либо выраженное человеком в словесной или образной форме, обладает абсолютной психической реальностью, мы можем утверждать, что любая аналогия помогает уточнить, объяснить и подтвердить наше толкование мотивов сновидения постольку, поскольку она указывает на те же архетипические представления. Такая амплификация представляет собой новый и плодотворный научный метод исследования психологем, мифологем и самых разнообразных психических структур.

Амплификацию следует применять к любым элементам сновидения – если только мы хотим сформировать для себя некую общую картину, на основании которой можно было бы расшифровать скрытый «смысл». В рамках юнговского метода амплификации различные мотивы сна «обрастают» родственными образами, символами, легендами, мифами и т. п., в результате чего постепенно выявляются их самые различные аспекты и возможные смыслы; в конечном счете, это приводит к полному прояснению их значения. Полученные смысловые элементы связываются друг с другом, и в итоге формируется непрерывная цепь мотивов сна, а сам сон, как некое единство, становится доступен окончательной верификации.

Редуцирующая интерпретация

Если, например, в качестве элемента сна выступает фигура реального отца, амплификация может обогатить и расширить ее до масштабов идеи «отцовства» как такового.

Фрейд со своей редукцией задается вопросами «почему?» и «откуда?», тогда как Юнг, со своим методом толкования снов, в первую очередь интересуется вопросом «зачем?», «с какой целью?»: каковы были намерения бессознательного, что оно хотело сообщить индивиду, посылая ему этот сон? Например, интеллектуалу снится, будто он проходит под большим мостом-радугой. Его удивляет, что он идет под мостом, а не по нему. Сон стремится показать, что избранный этим человеком способ разрешения личных проблем нереален, и указывает ему верный путь – не по мосту, а под мостом. Для интеллектуалов, предполагающих, будто они вполне могут игнорировать собственную инстинктивную природу и строить свою жизнь на чисто рассудочных, рациональных основаниях, подобные намеки часто оказываются весьма уместны. Как видим, этот сон служит предостережением, призванным открыть человеку глаза на его реальную психическую ситуацию.

Динамический аспект сна

Сон имеет определенную «цель», состоящую в раскрытии неких обстоятельств, существования которых сновидец либо не сознает, либо не хочет сознавать. Объяснить такие сны нетрудно, ибо это своего рода притчи, в которых сразу же обнаруживаются предостерегающие знаки. Последние выражают динамические тенденции бессознательного, то есть силы, стоящие за сновидением и его зримыми элементами. Благодаря этим силам в сознание вливаются новые содержательные элементы; сознание определенным образом реагирует на них и, соответственно, модифицирует силовое поле бессознательного. Динамический процесс, не выявляемый в рамках одного сна, но легко прослеживаемый в серии снов, нейтрализует прерывность аналитических сеансов и обеспечивает возможность осуществлять анализ с большими перерывами между сеансами. Как уже говорилось, динамика процесса имеет цель и смысл; если какой-то отдельный сон был истолкован ложно, за ним непременно последуют другие сны, которые исправят ошибку и вновь выведут аналитика на верный путь.

Согласно упомянутому выше принципу сохранения энергии, в психической субстанции ничто не теряется бесследно. Между всеми ее элементами происходит энергетический взаимообмен; все они интегрированы в осмысленное, но при этом пребывающее в постоянном развитии целое. «Деятельность бессознательного никогда не прерывается; комбинируя свой материал, бессознательное действует в интересах будущего. Ни в чем не уступая сознательному разуму, оно продуцирует подпороговые сочетания, способные предвосхищать ход событий – причем продукты бессознательного куда более утонченны и разнообразны, чем сочетания, порожденные сознанием. Именно поэтому бессознательное может служить человеку единственным в своем роде проводником – при условии, что он сумеет удержаться от соблазнов и не позволит завести себя на ложный путь».

В сновидениях мы распознаем признаки, характеризующие не только ситуацию рассказчика на данный момент времени, но и прогресс (или отсутствие такового) в аналитическом процессе. Зафиксированные вне контекста и без учета сведений о рассказчике, сны вполне могут показаться бессмысленными. Но будучи поняты и должным образом разработаны, они могут оказать исключительно сильное, даже освобождающее воздействие на индивида, чьи проблемы они выражают и разъясняют. «На бумаге толкование снов может казаться произвольным, туманным или просто ложным; но в действительной жизни то же самое часто выглядит как драма, характеризующаяся непревзойдённым реализмом».

Индивидуальный и коллективный смысл

Субъективный, индивидуальный смысл сна восполняется субъективными амплификациями: аналитик спрашивает рассказчика, что значат для него лично отдельные элементы сна. Затем, с помощью объективной амплификации, выявляется коллективный смысл сна: элементы сна обогащаются универсальным, символическим материалом сказок, мифов и т. п., тем самым проясняя универсальный аспект проблемки касающийся любого человеческого существа.

Сны, богатые живописными подробностями, отражают прежде всего проблемы самой личности; они принадлежа» сфере личностного бессознательного, и их резко очерченные образы, будучи воплощением вытесненной или подавленной «инакости», дополняют бодрствующее сознание. С другой стороны, сны, характеризующиеся скупыми деталями и простыми образами, несут в себе сообщения о неких весьма значительных, универсальных контекстах; они представляют космос, вечные законы природы, истину. Как правило, они позволяют заключить, что сознание вышло на уровень сверхдифференциации или даже автономности, что оно далеко ушло от бессознательного; выражая стремление к компенсации, они обычно пользуются образами коллективного бессознательного.

Сон – это утверждение, свободное от влияний со стороны сознания, отражающее внутреннюю правду индивида, его внутреннюю действительность – такую, «какова она на самом деле: не мои гипотетические предположения относительно этой действительности, не то, какой сам индивид хотел бы ее видеть, а именно ее самое». Итак, с точки зрения Юнга явное содержание сна – это не внешняя оболочка, а непреложная данность, которая всегда раскрывает и выражает то, что имеет в виду и хочет сообщить бессознательное. Когда, например, во сне появляется змея, существенно то, что это именно змея, а не бык или какое-то иное животное. Змея избирается бессознательным в силу ее характерного облика; связанное с ней богатое смысловое поле сообщает индивиду в точности то, что входит в «намерения» бессознательного. Мы устанавливаем смысл змеи для сновидца не через цепочку ассоциаций, а через амплификацию, благодаря которой символ змеи дополняется самыми разнообразными аллюзиями и связями (например, мифами), имеющими отношение к змее как определенному устойчивому образу и согласующимися с субъективной психической констелляцией сновидца. В отличие от Фрейда, мы не рассматриваем змею как «прикрытие», а считаем, что она, именно как змея, призвана сообщить сновидцу нечто в высшей степени специфическое; поэтому в процессе интерпретации сна мы не пытаемся во что бы то ни стало определить, что же может скрываться за данным символом. Напротив, в анализ вовлекается весь контекст символа.

Функция и смысл символа сновидения могут быть распознаны только исходя из соответствующего контекста – подобно тому, как из контекста вытекает изобразительное значение цвета (только формой и цветовой гаммой картины как целостной структуры определяется то, что именно обозначает серое пятно на ней – тень, световой рефлекс, пятно грязи или прядь волос). Если мы вдобавок будем учитывать психическую конституцию рассказчика, его жизненную ситуацию и осознанную психическую ориентацию, смысл увиденного во сне образа сам собой проявится во всем комплексе его субъективных ответвлений.

Абстрагируясь от ассоциаций и соображений, связанных с личностью сновидца и контекстом сна, мы можем рассчитывать только на истолкование коллективного, общечеловеческого аспекта сна, то есть содержащихся в сновидении архетипических мотивов. Именно поэтому интерпретация сна как такового не может восприниматься сновидцем как нечто жизненно важное. Интерпретируя сон как таковой, мы выявляем только его архетипический смысл и, значит, должны воздерживаться от соображений, относящихся к обстоятельствам жизни и свойствам личности рассказчика. Сами архетипы не содержат в себе никакого толкования: ведь это отражения наших инстинктов или, как их называл Юнг, «органы нашей души», образы самой природы. Чтобы прийти к верному толкованию или отвергнуть ложное, мы должны иметь в виду личность сновидца. Совершенно очевидно, что один и тот же мотив будет существенно различаться по смыслу в зависимости от того, снится ли он ребенку или пятидесятилетнему человеку.

Формы интерпретации

Юнг различает две формы или плоскости интерпретации: субъектный уровень и объектный уровень. На субъектном уровне фигуры и события сна толкуются символически, как отражения душевных факторов и обстоятельств жизни самого рассказчика. Рассматриваемые на этом уровне, фигуры сна представляют тенденции или функции психики рассказчика, а события сна отражают его установку по отношению к самому себе и к собственной психической реальности. Понимаемый таким образом сон указывает на данные внутреннего (интрапсихического) порядка.

Что же касается толкования на объектном уровне, то здесь фигуры сна трактуются не символически, а конкретно. Они представляют установку индивида по отношению к внешним фактам и окружающим людям. Их цель состоит в том, чтобы с полной объективностью показать оборотную сторону вещей, которые разумное око индивида наяву видит только с одной стороны, либо в том, чтобы раскрыть индивиду глаза на то, чего он прежде не замечал.

Предположим, некто видит во сне своего отца – которого он всегда считал благородным и добрым человеком – в виде деспотического, жестокого, эгоистичного и грубого существа. Толкуемое на субъектном уровне, это сновидение означает, что сновидец таит все эти качества в глубинах собственной души, но не сознает их присутствия или не представляет всей степени их реальности. Толкуемое на объектном уровне, оно выявляет истинный характер отца сновидца, – хо чего последний прежде не знал или не умел распознать.

Когда в сновидении появляются близкие сновидцу люди, это следует толковать не только на субъектном уровне (с точки зрения того, как в соответствующих фигурах отражаются отдельные стороны психической субстанции сновидца), но и на объектном уровне. На субъектном уровне мы толкуем сон как репрезентацию субъективных образов, как воплощение или проекцию бессознательных комплексов анализируемого лица. Так, фигура друга мужского пола в сновидении женщины может интерпретироваться как образ мужского элемента в ее собственной психической субстанции. Не будучи распознан ее сознанием, этот элемент скрыт в сфере ее бессознательного и выявляется благодаря проецированию его на постороннего человека. Смысл этой фигуры сна состоит в том, что она обращает внимание пациентки на ее собственный мужской аспект, на качества, о присутствии которых в себе она не знала или, во всяком случае, не хотела знать. Это может иметь исключительно важное значение для женщины, ошибочно считающей себя крайне хрупким, чувствительным, женственным существом – например, для типа суетливой старой девы.

Статья составлена на основании работы Иоланды Якоби «Психологическое учение Карла Густава Юнга».

Вывод. Психоанализ применим в практике предвосхищения.

Данный текст является ознакомительным фрагментом.

Простая, быстрая и чувствительная портативная молекулярная диагностика вируса SFTS с использованием изотермической амплификации, опосредованной обратной транскрипционной петлей (RT-LAMP)

Сравнительное исследование

. 2018 28 ноября; 28 (11): 1928-1936.

doi: 10.4014/jmb.1806.06016.

Юн Хи Бэк ¹ , Хё-Сун Чеон ¹ , Су-Джин Парк ¹ , Кристин Кейт С Льорен ¹ , Су Чжон Ан ¹ , Джу Хван Чжон ¹ , Вон-Сук Чой ¹ , Мин-Ах Ю ¹ , Хёк-Иль Квон ¹ , Джин-Юнг Квон ¹ , Ын-Ха Ким ¹ , Янг-Ил Ким ¹ , Кристин Джой С Антигуа ¹ , Сок-Ён Ким ¹ , Хе Вон Чжон ^{2 3} , Янг Ки Чой ¹ , Песня Мин-Сук ¹

Принадлежности

• ¹ Кафедра микробиологии, Медицинский колледж национального университета Чунгбук и Институт медицинских исследований, Чхонджу 28644, Республика Корея.
• ² Кафедра внутренних болезней, Медицинский колледж национального университета Чунгбук и Институт медицинских исследований, Чхонджу 28644, Республика Корея.
• ³ Отделение внутренних болезней, Больница национального университета Чунгбук, Чхонджу 28644, Республика Корея.

• PMID: 30270605
• DOI: 10.4014/jmb.1806.06016

Бесплатная статья

Сравнительное исследование

Yun Hee Baek et al. J Microbiol Biotechnol. 2018 .

Бесплатная статья

. 2018 28 ноября; 28 (11): 1928-1936.

doi: 10.4014/jmb.1806.06016.

Авторы

Юн Хи Бэк ¹ , Хё-Сун Чеон ¹ , Су-Джин Парк ¹ , Кристин Кейт С Льорен ¹ , Су Чжон Ан ¹ , Джу Хван Чжон ¹ , Вон-Сук Чой ¹ , Мин-Ах Ю ¹ , Хёк-Иль Квон ¹ , Джин-Юнг Квон ¹ , Юн-Ха Ким ¹ , Янг-Ил Ким ¹ , Кристин Джой С Антигуа ¹ , Сок-Ён Ким ¹ , Хе Вон Чжон ^{2 3} , Янг Ки Чой ¹ , Песня Мин-Сук ¹

Принадлежности

• ¹ Кафедра микробиологии, Медицинский колледж национального университета Чунгбук и Институт медицинских исследований, Чхонджу 28644, Республика Корея.
• ² Кафедра внутренних болезней, Медицинский колледж национального университета Чунгбук и Институт медицинских исследований, Чхонджу 28644, Республика Корея.
• ³ Отделение внутренних болезней, Больница национального университета Чунгбук, Чхонджу 28644, Республика Корея.

• PMID: 30270605
• DOI: 10.4014/jmb.1806.06016

Абстрактный

В последнее время в Восточной Азии резко возросло число случаев инфицирования людей, вызванных тяжелой лихорадкой вирусом синдрома тромбоцитопении (SFTSV), которые могут привести к летальному исходу. При отсутствии вакцин или противовирусных препаратов для профилактики и/или лечения инфекции SFTSV, ранняя быстрая диагностика имеет решающее значение для профилактики и контроля заболевания. Здесь мы сообщаем о разработке простого, быстрого и чувствительного портативного метода обнаружения инфекции SFTSV с использованием изотермической амплификации, опосредованной петлей обратной транскрипции (RT-LAMP), в сочетании с колориметрической визуализацией в одном горшке и безэлектродной реакционной платформой. В этом методе используется карманный обогреватель для облегчения диагностики в условиях ограниченных ресурсов. Конкретные праймеры были разработаны для нацеливания на высококонсервативную область гена L SFTSV. Предел обнаружения анализа RT-LAMP составлял приблизительно 10 ⁰ копий вирусного генома из трех разных штаммов SFTSV. Этот анализ показал чувствительность, сравнимую с qRT-PCR, и в 10 раз большую чувствительность, чем обычная RT-PCR, с быстрым временем обнаружения от 30 до 60 минут. Анализ RT-LAMP с использованием клинических образцов SFTSV продемонстрировал уровень обнаружения, аналогичный qRT-PCR, и более высокий уровень обнаружения по сравнению с обычной RT-PCR. Кроме того, не наблюдалось перекрестной реактивной амплификации других инфекционных вирусов человека, включая вирус японского энцефалита (JEV), денге, энтеровирус, вирус Зика, грипп и коронавирус ближневосточного респираторного синдрома (MERS-CoV). Этот высокочувствительный, не требующий электричества и оборудования метод быстрой колориметрической визуализации подходит для полевой диагностики SFTSV с ограниченными ресурсами.

Ключевые слова: РТ-ЛАМПА; СФЦВ; колориметрическая визуализация; карманный утеплитель.

Похожие статьи

• Создание нового одноэтапного изотермического анализа амплификации, опосредованного петлей обратной транскрипции, для быстрой идентификации РНК вируса тяжелой лихорадки с синдромом тромбоцитопении.

  Сюй Х., Чжан Л., Шен Г., Фэн С., Ван Х., Ян Дж., Чжан Ю. Сюй Х и др. Дж. Вироловые методы. 2013 дек;194(1-2):21-5. doi: 10.1016/j.jviromet.2013.07.037. Epub 2013 30 июля. Дж. Вироловые методы. 2013. PMID: 23911296

• Разработка анализа RT-LAMP для быстрого обнаружения вируса SFTS.

  Сано С., Фукуси С., Ямада С., Харада С., Киношита Х., Сугимото С., Йошикава Т., Куросу Т., Такамацу Ю., Шимодзима М., Тода С., Хамада Ю., Фудзисава Н., Сугимото Т., Сайдзё М. Сано С. и др. Вирусы. 2021 16 апр;13(4):693. doi: 10.3390/v13040693. Вирусы. 2021. PMID: 33923720 Бесплатная статья ЧВК.

• Обнаружение новой РНК буньявируса с помощью изотермической амплификации, опосредованной петлей обратной транскрипции.

  Хуан XY, Ху XN, Ма Х, Ду YH, Ма HX, Кан К, Ю А. Г., Ван Х.Ф., Чжан Л., Чен Х.М., Думлер Дж.С., Сюй Б.Л. Хуанг XY и др. Дж. Клин Микробиол. 2014 фев; 52 (2): 531-5. doi: 10.1128/JCM.01813-13. Epub 2013 4 декабря. Дж. Клин Микробиол. 2014. PMID: 24478484 Бесплатная статья ЧВК.

• Разработка метода изотермической амплификации, опосредованной петлей, в реальном времени для выявления тяжелой лихорадки с вирусом синдрома тромбоцитопении.

  Lee JW, Won YJ, Kang LH, Lee SG, Park SW, Paik SY. Ли Дж. В. и др. J микробиол. 2020 авг; 58 (8): 711-715. doi: 10.1007/s12275-020-0109-1. Эпаб 2020 18 мая. J микробиол. 2020. PMID: 32424580 Бесплатная статья ЧВК.

• Обнаружение вирусной РНК в различных жидкостях организма у пациента с SFTS с энцефалопатией, желудочно-кишечным кровотечением и пневмонией: отчет о клиническом случае и обзор литературы.

  Акаги К., Миядзаки Т., Осима К., Умемура А., Симада С., Морита К., Сенджу Х., Таширо М., Таказоно Т., Сайдзё Т., Курихара С., Секино М., Ямамото К., Имамура Й., Изумикава К., Янагихара К., Уда А., Морикава С., Йошикава Т., Куросу Т., Симодзима М., Сайдзё М., Мукаэ Х. Акаги К. и др. BMC Infect Dis. 2020 15 апреля; 20 (1): 281. дои: 10.1186/s12879-020-05012-8. BMC Infect Dis. 2020. PMID: 32295538 Бесплатная статья ЧВК. Обзор.

Посмотреть все похожие статьи

Цитируется

• Разработка ИФА на основе моноклональных антител IgG и IgM для диагностики тяжелой лихорадки с вирусной инфекцией синдрома тромбоцитопении.

  Чжан М., Ду И, Ян Л., Чжан Л., Ян Б., Хуан Х., Сюй Б., Морита К., Ю Ф. Чжан М. и др. Braz J Infect Dis. 2022 июль-август;26(4):102386. doi: 10.1016/j. bjid.2022.102386. Epub 2022 11 июля. Braz J Infect Dis. 2022. PMID: 35835158 Бесплатная статья ЧВК.

• Новый метод, основанный на иммунохроматографической полоске LAMP-CRISPR-Cas12a-Lateral Flow для обнаружения.

  Xu H, Tang H, Li R, Xia Z, Yang W, Zhu Y, Liu Z, Lu G, Ni S, Shen J. Сюй Х и др. Заразить устойчивостью к наркотикам. 2022 27 февраля; 15: 685-696. doi: 10.2147/IDR.S348456. Электронная коллекция 2022. Заразить устойчивостью к наркотикам. 2022. PMID: 35250283 Бесплатная статья ЧВК.

• Разработка мультиплексного анализа изотермической амплификации с петлевой связью (LAMP) для определения тяжелой лихорадки с синдромом тромбоцитопении (SFTS) и скрабирующим сыпным тифом.

  Jang WS, Lim DH, Choe YL, Nam J, Moon KC, Kim C, Choi M, Park I, Park DW, Lim CS. Джанг В.С. и др. ПЛОС Один. 2022 16 февраля; 17 (2): e0262302. doi: 10.1371/journal.pone.0262302. Электронная коллекция 2022. ПЛОС Один. 2022. PMID: 35171943 Бесплатная статья ЧВК.

• Быстрая молекулярная диагностика пареховирусной инфекции с использованием метода изотермической амплификации, опосредованной петлей обратной транскрипции.

  Йокояма Т., Тасаки Ю., Иноуэ Н., Сугимото Н., Нариаи Э., Курамото С., Вада Т. Йокояма Т. и др. ПЛОС Один. 2021 29 ноября; 16 (11): e0260348. doi: 10.1371/journal.pone.0260348. Электронная коллекция 2021. ПЛОС Один. 2021. PMID: 34843518 Бесплатная статья ЧВК.

• Клиническое обновление тяжелой лихорадки с синдромом тромбоцитопении.

  Seo JW, Kim D, Yun N, Kim DM. Сео Дж. В. и др. Вирусы. 2021 23 июня; 13 (7): 1213. дои: 10.3390/v13071213. Вирусы. 2021. PMID: 34201811 Бесплатная статья ЧВК. Обзор.

Просмотреть все статьи «Цитируется по»

Типы публикаций

термины MeSH

вещества

Дополнительные понятия

Простой метод выделения ДНК для ПЦР-амплификации из молодых иголок Cedrus Deodara

Простой метод выделения ДНК для ПЦР-амплификации из молодых иголок Cedrus Deodara

Исследовательская статья, опубликованная журналом IJSER, посвящена простому методу выделения ДНК для ПЦР-амплификации из молодых иголок Cedrus Deodara 1

ISSN 2229-5518

Простому методу извлечения ДНК для ПЦР-амплификации из молодых игл Cedrus Deodara

Камрадж Сингх*, Шалини Сингх, Рахул Саху

РЕЗЮМЕ. Молекулярно-генетический анализ требует хорошего качества ДНК в достаточном количестве для получения надежной ДНК, снятия отпечатков пальцев. Простой и надежный метод выделения ДНК из молодых хвоинок (листьев) C. deodara был разработан в нашей лаборатории. NACl и PVP использовали для удаления полисахаридов и полифенолов во время очистки ДНК. В этом методе масло и белки молодой хвои удалялись только центрифугированием. Хороший результат молекулярных маркеров SSR (повтор простой последовательности) на ДНК молодой хвои другого C. deodara указывает на то, что ДНК, выделенная из хвои Янга, не содержит обычных загрязняющих соединений. Таким образом, этот метод может быть широко использован для выделения ДНК из молодой хвои 9 растений.0267 К. деодара .

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА- ДНК, Экстракция, Cedrus deodara , SSR, Жидкий азот, β-меркаптоэтанол

——————————  ——————————

1. ВВЕДЕНИЕ

edrus deodara является экологически и экономически важным
видом лесных деревьев западных Гималаев и считается исчезающим видом хвойных в этом регионе. Микросателлитные маркеры (SSR) были использованы для изучения генетической изменчивости в пределах C. deodara . Недавно этот вид был использован для молекулярного анализа, такого как анализ генетической изменчивости (Seysis et al., 2003, Pallet et al., 2006) и картирование генов (Lombard and deloureme,

2001, kole et al., 2002, Джавинфар и др., 2006). Большинство методов выделения растительной ДНК по существу представляют собой либо метод CTAB (Murray and Thompson, 1980), либо метод SDS-ацетата калия (Delloporta et al., 1983). Однако эти методы не подходят для большого количества выделений ДНК в короткий период времени, например, для большого количества, например, для селекции с помощью маркеров в селекции рапса из-за их трудоемкости, были разработаны различные простые методы с использованием листьев в качестве материала, такие как прямая амплификация ткани хвои (Бертомилу и Майер , 1991), метод кипячения (Thomson and Henry, 1995, Ikeda et al., 2001) и метод обработки щелочью (Xin et al. , 2003). У других видов ( Brassica napus ) мы успешно протестировали несколько процедур выделения ДНК с использованием сухих семян в качестве материала (Horn, 1992, Li et al., 1994), но для молодой хвои было разработано несколько методов C. deodara . В этой статье мы сообщили о простой экстракции ДНК молодых иголок C. deodara ; его можно было закончить очень быстро, и он мог производить ДНК относительно высокого качества для молекулярных маркеров SSR.

 Камрадж Сингх Томар*, MSc. Биотехнология, кафедра биотехнологии, Dolphin (PG) Instt. Биомедицинских и естественных наук, Дехрадун (Уттаракханд) #, [email protected]

 Шалини Сингх, кафедра биотехнологии #.

 Рахул Саху, MSc. Биохимия, кафедра биохимии #
[email protected]

R © 2012

www.ijser.org

Экстракция ДНК

2.2 Методы:

2.2.1 Метод экстракции ДНК молодой хвои

(Листья)

мМ ЭДТА, 5 мМ аскорбиновой кислоты, 2% C-TAB, 2% ПВП).
 К 1 мл предварительно нагретого экстракционного буфера добавляли 3 мкл β-меркаптоэтанола в 2 мл пробирках Эппендорф.
 Листья измельчали ​​в протертой спиртом ступке пестиком с непрерывным добавлением жидкого азота, и порошок переносили в пробирки Эппендорф, содержащие предварительно нагретый буфер для экстракции.
 Встряхивайте пробирки Эппендорф в течение 15 секунд.
 Инкубируют на водяной бане в течение 30 минут при 60°С.
 Добавляли 500 мкл раствора хлороформа:изоамилового спирта
(24:1) с последующей инверсией.
 Центрифугировали при 13 000 об/мин в течение 5 мин (40°С).
 Супернатант осторожно перенесли в пробирки Эппендорф на 1,5 мл.
 Добавили 500 мкл холодного (-200°C) изопропанола и перемешали переворачиванием.
 Инкубировали в течение ночи при -200С. Затем центрифугируют при 40°С при
13000 об/мин в течение 15 минут с получением осадка.
 Добавлено 998 мкл 76% этанола и 2 мкл ацетата аммония с последующим переворачиванием в течение нескольких минут на гелевой качалке.
 Снова центрифугируют в течение 5 минут и добавляют 500 мкл 70% этанола и центрифугируют в течение 15 минут при 40°С со скоростью 13000 об/мин.
 Осадок высушивают в вакууме и растворяют в 100-200 мкл буфера
TE.

Исследовательская статья, опубликованная в журнале IJSER, посвящена простому методу выделения ДНК для ПЦР-амплификации из молодых иголок Cedrus Deodara 2

ISSN 2229-5518

2.2.2 Анализ SSR: —

26106 использовались для анализа SSR. Процедуру ПЦР проводили по методу Saal et al. . (2001 ) и LI и др. (2005 г.). Профили реакции ПЦР были следующими: 94°С при 60 с, затем 35 циклов по 60 с при 94°С, 60 с при 61°С и 1,5 мин при 72°С, удлинение при 72°С в течение 10 мин. а затем направляйтесь в
40C. 20 мкл формамидного загрузочного буфера добавляли в продукт реакции селективной амплификации
, смешанный образец денатурировали в течение 950С в течение 5 мин. охлаждали на льду и затем анализировали в 6% геле PAGE. Гель окрашивали наборами для окрашивания серебром в соответствии с инструкциями производителя.

Рис. 1: Изображение геля тотальной геномной ДНК, выделенной из молодых иголок C. Deodara с использованием модифицированного протокола. Копье 1-25, показывающее выделенную геномную ДНК.

Рис. 2: Образец SSR, полученный из ДНК, извлеченной из модифицированного протокола. 25 различных образцов ДНК (дорожки 1-25), амплифицированных с использованием основного Pt 26081. Маркер молекулярной массы дорожки-M.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ:-

В большинстве случаев для выделения ДНК использовались свежие иглы (Murray and Thompson, 1980; Dellaporta et al. .,
1983; Saghai-Maroof et al., 1984; Doyle and Doyle, 1987; Lange и др. , 1998). Сообщалось также о методе выделения ДНК с использованием семян в качестве материала для некоторых культур, таких как рис
(Chunwonges et al., 1993; Peng et al. . , 2002), кукуруза
(McDonald et al., 9).0268 1994) и соевые бобы (Young et al., 2003). Мы получили ДНК более высокого качества из свежих игл C. deodara , используя описанный выше протокол. Жирная кислота и белки были основными компонентами хвои C. deodara . Поскольку жирная кислота имеет меньшую плотность и неполярные характеристики, ее можно легко отличить от водной фазы при центрифугировании. Фенол и хлороформ часто использовались для удаления белка в обычном методе выделения ДНК; нужно было только короткое центрифугирование, чтобы отделить ДНК от всех других загрязнителей в нашем настоящем протоколе, поскольку большинство белков удалялось в нерастворимый осадок. 1M NaCl добавляли в экстракционный буфер для удаления полисахаридов за счет повышения их растворимости в этаноле (Fange и др. ., 1992). Для удаления полифенолов из свежей хвои в экстракционный буфер добавляли ПВП согласно результату Малиякала (1992).
Используя описанный выше протокол экстракции ДНК, мы получили ДНК более высокого качества из свежих игл C. deodara с A260/A280 между 1,7 и 2,0, что указывает на то, что белок можно удалить центрифугированием. Далее ДНК анализировали в агарозном геле, деградации ДНК не наблюдалось, а средний размер полос составлял около 20 т.п.о. (рис.1). ДНК, выделенная из свежей хвои, успешно использовалась в SSR-анализе. Хороший результат амплификации молекулярных маркеров SSR также подтвердил хорошее качество этих 25 образцов ДНК (рис. 2). РНК можно было удалить путем расщепления образца РНКазой (Horn. 9).0291 1992). В нашем эксперименте мы обнаружили, что РНК не мешала развитию маркера, поэтому этап добавления РНКазы А может быть удален в разработанном нами протоколе. В заключение, наш недавно разработанный протокол экстракции ДНК может производить чистую и высококачественную ДНК, подходящую для молекулярного анализа SSR в C. deodara.

БЛАГОДАРНОСТЬ

Мы хотим выразить искреннюю благодарность директору Dolphin (PG) Instt. Биомедицинских и естественных наук, Дехрадун (Уттаракханд)

ССЫЛКИ

1. Berthomieu P. and C. Meyer, 1991. Прямая амплификация геномной ДНК растений из кусочков листьев и корней с использованием ПЦР. Завод Мол. биол., 17: 555-557.
2. Чунвонгес Дж., Г.Б. Мартин и С.Д. Tanksley,
1993. Определение генотипа перед прорастанием с использованием ПЦР
амплификации полусемян. Теро. Applied Genet.,
86: 694-698.

IJSER © 2012

http://www.ijser.org

Исследовательская статья, опубликованная журналом IJSER, посвящена простому методу выделения ДНК для ПЦР-амплификации из молодых иголок Cedrus Deodara 3

ISSN 2229-5518

3. Dellaporta S., J. Wood and J.B Hicks, 1983. Минипрепарат растительной ДНК: Версия II. Завод Мол. биол. Отв., 1: 19-21.
4. Дойл Дж. Дж. и Дойл Дж. Л., 1987. Процедура быстрого выделения ДНК для небольшого количества ткани свежих листьев. Фитохим. Бык., 19: 11-15.
5. Fung G., S. Hammar и R. Rebecca, 1992. Быстрый и дорогой метод удаления полисахаридов из геномной ДНК растений. Биотехнология, 13:52-56.
6. Horn P. and A. Rafalski, 1992. Неразрушающая генетическая диагностика RAPD эмбрионов Brassica, происходящих из микроспор. Завод Мол. биол. Rep., 10: 285-
293.
7. Икеда Н., Н.С. Bautista, T. Yamada, O. Kamijima and T. Ishii, 2001. Ультрапростой метод выделения ДНК для селекции с помощью маркеров с использованием микросателлитных маркеров в рисе. Завод Мол. биол. Хран.,
19: 27-32. Джавидфар Ф., В.Л.
8. Коле К., К.Э. Торманн, Б.Х. Карлссон, Дж. П. Палта, стр.
Гаффни, Б. Янделл и Т.К. Osborn, 2002. Сравнительное картирование локусов, контролирующих зимнюю выживаемость и связанные с ними признаки масличных культур Brassica rapa и B. napus . Мол. Порода., 9: 201-210.
9. Lange D.A., S. Penuela и R.L. Denny, 1998. Протокол выделения растительной ДНК, подходящий для селекции с использованием маркеров на основе полимеразной цепной реакции. Обрезать. наук, 38: 217-220.
10. Ли Дж., Б.З. Шен и Дж. К. Хан, 1994. Эффективный способ выделения тотальной ДНК из семян рапса. Дж.
Хуачжун. Агр. ун-та, 13: 521-523.
11. Li M., C. Zhang, Z. Li and J. Meng, 2005. Анализ биологических признаков у гексаплоидных гибридов, полученных от Brassica carinata и B. rapa . Акта. Агрономика Синица, 12: 1579-1585.
12. Li M., Z. Li, C. Zhang, W. Qian and J. Meng, 2005.
Репродукция и цитогенетическая характеристика межвидовых гибридов, полученных в результате скрещивания Brassica carinata и B. rapa . Теор. Прикладной Жене.
110: 1284-1289.
13. Ломбард В. и Р. Делорм, 2001 г. Согласованная карта сцепления
для рапса ( Brassica napus L.): построение и объединение трех отдельных карт из популяций DH. Теор. Applied Genet., 103:
491-507.
14. Малиякал Э.Дж., 1992. Эффективный метод выделения РНК и ДНК из растений, содержащих полифенолы. Нукл. Acids Res., 20: 2381-2381.
15. McDonald M.B., L.J.Elliot and P. M. Суинири,
1994. Экстракция ДНК из сухих семян для анализа RAPD в исследованиях по идентификации сортов. Семенная наука. Техн., 22: 171-176.
16. Мюррей М.Г. и В.Ф. Thompson, 1980. Быстрое выделение высокомолекулярных ДНК. Nucleic Acids Res., 8: 4321-4325.
17. Peng S., Q. Yan, X. Wang и C. Zhang, 2002. Экстракция ДНК из отдельных семян и оптимизация процедуры RAPD для риса. Дж. Шанхай. Цзяотун. ун-т (Сельскохозяйственная наука), 20: 34-37.
18. Рипли В. Рослински, Х. Зейнали и К. Абдмишани, 9 лет0291 2006. Идентификация молекулярных маркеров, связанных с олеиновой и линоленовой кислотой, в яровом рапсе ( Brassica napus ). Порода растений., 125: 65-71.
19. Саал Б., Дж. Плиске, Дж. Ху, К.Ф. Quiros and D. Stress,
2001. Микосателлитные маркеры для анализа генома Brassica. II. Отнесение микосателлитов рапса к геномам А и С и генетическое картирование у Brassica oleracea L. Theor. Applied Genet., 102:
695-699.
20. Сагай-Маруф, М. А., К.М. Солиман, Р.А. Йоргенсен и Р. В. Аллард, 19 лет84. Полиморфизм длин спейсеров рибосомной ДНК у ячменя: менделевское наследование, расположение хромосом и динамика популяции. проц. Солод. акад. науч. USA., 81: 8014-
8018.
21. Seyis F., R.J. Snowdon, W. Luhs and W. Friedt,
2003. Молекулярная характеристика новых ресинтезированных линий рапса и анализ их генетического разнообразия по сравнению с сортами ярового рапса. Порода растений., 122: 473-478.
22. Томсон Д. и Р. Генри, 19 лет.95. Одноэтапный протокол подготовки растительной ткани к анализу методом ПЦР. Биотехнология, 19: 394-400.
23. Xin Z., J.P. Veiten, M.J. Oliver and J.J. Burke, 2003.
Высокопроизводительный метод выделения ДНК, подходящий для ПЦР
. Биотехнология, 34: 820-825.
24. Ян С., Л. Чжан и Х. Дуань, 2003 г. Экспресс-экстракция соевых бобов для ПЦР из сухих семян. Soybean Sci., 22: 151-153.

IJSER © 2012

http://www.ijser.org

Международный журнал научных и инженерных исследований, том 3, выпуск 12, декабрь 2012 г.