Определение фенотипа: Определение фенотипа резус-фактора и антигена К системы Келл

Фенотип антигенов эритроцитов и индекс сенсибилизации у доноров компонентов крови и пациентов г. Астаны

Ж.К. Буркитбаев, Р.Б. Меирбекова, Е.Н. Курганская, Л.Л. Карп, Р.З. Магзумова

Научно-производственный центр трансфузиологии, г. Астана, Казахстан

 

Трансфузиология №2, 2013

 

Резюме

В результате проведенного исследования установлено большое разнообразие фенотипов в системе Резус, а также достаточно высокая степень сенсибилизации у реципиентов и высокий индекс сенсибилизации населения города Астаны.

Ключевые слова: антигенный состав эритроцитов.

Введение

Исследование распространенности у доноров основных клинически значимых антигенов эритроцитов, определение индекса аллоиммунизации является непременным условием адекватной профилактики посттрансфузионных реакций и осложнений гемолитического типа. Определение группы крови, резус-принадлежности и типирование антигенов эритроцитов имеет большое значение при проведении гемотрансфузий для подбора совместимых пар донор-реципиент и профилактики наиболее опасных для жизни реципиентов посттрансфузионных осложнений гемолитического типа [1–16].

Методика агглютинации в геле была разработана с целью стандартизации реакций гемагглютинации и получения достоверных результатов. Тестирование на индивидуальную совместимость крови донора и реципиента по антигенам эритроцитов не заменяет обязательное иммуногематологическое исследование, а лишь дополняет его. Использование гелевой системы позволяет также снизить риск заражения персонала даже при работе с потенциально инфицированными образцами [2]. Благодаря высокой чувствительности, стандартности и хорошей воспроизводимости результатов, методы агглютинации в геле получили широкое распространение [3].

Цель и задачи исследования

Целью работы явилось изучение частоты встречаемости антигенов эритроцитов и определение уровня сенсибилизации населения г. Астаны.

Материал и методы исследования

Материалом исследования служили 119882 образцов крови доноров и 6313 реципиентов за период 2010–2012 гг. Возраст доноров колебался от 18 до 60 лет. Средний возраст доноров составил 43,4±5,1 года. Возраст больных колебался от 0 до 77 лет. Средний возраст больных составил 37,9±9,5 года. Среди доноров было 64736 мужчин (54,0%) и 55146 – женщин (46,0%). Среди реципиентов мужчины составили 66,9%, женщины – 33,1%. Контингент обследованных пациентов: реципиенты, в анамнезе которых многократные трансфузии; беременные, входившие в группу риска по аллоиммунизации; дети с гемолитической болезнью новорожденных. Все образцы крови доноров исследовались на групповую принадлежность по системе АВО перекрестным методом с использованием моноклональных антител, стандартных эритроцитов, а также методом микроколоночной агглютинации с использованием кассет ORTHO BioVue. Образцы крови реципиентов исследовались на групповую принадлежность по системе АВО с применением гелевой методики Scangel. А нтиген D с истемы Р езус выявляли с помощью Цоликлона АнтиD Супер (ООО «Гематолог», Москва) и с применением метода микроколоночной агглютинации с использованием кассет ORTHO BioVue, дополнительно все RH(D)-отрицательные доноры (3464 из 119 тысяч) исследовались на наличие вариантных и слабых форм антигена D с помощью моноклональных антител анти-Rh2(D)/ RhW1 в реакции Кумбса с применением гелевой методики Scangel (Карты Scangel Кумбс анти-IgG, C3d), «BioRad Laboratories», США).

Все образцы крови доноров тестировались на наличие антигена К системы Кell с использованием моноклональных антител анти-К Супер (ООО «Гематолог», Москва) и с помощью метода микроколоночной агглютинации с использованием ORTHO BioVue анти-К. Все RH(D)-отрицательные доноры, а также «кадровые» RH(D)-положительные доноры были фенотипированы по антигенам С, с, Е, е системы Резус с использованием метода микроколоночной агглютинации с использованием кассет RH/K ORTHO BioVue, все реципиенты были фенотипированы по антигенам С, с, Е, е системы Резус с помощью гелевого метода с использованием карт Scangel Моноклональные RH/Kell производст- ва «Bio-Rad Laboratories», США. Во всех образцах крови доноров и реципиентов был проведен скрининг антиэритроцитарных аллоантител с помощью реакции Кумбса, выполненной с применением гелевой методики Scangel (Карты Scangel Кумбс анти-IgG, C3d), с эритроцитами Scangel I-II-III производства фирмы «Bio-Rad Laboratories», США-Франция). При положительных результатах скрининга проводилась идентификация анти- тел с эритроцитами ScanPanel из 10 линий клеток, «Bio-Rad laboratories», США.

Результаты и обсуждения

Нами было проанализировано распределение групп крови системы АВО у доноров и реципиентов (таблица 1).

Полученные данные свидетельствуют о том, что распределение групп крови по системе АВО у доноров и пациентов сходны. Преобладающими являются O и А группы крови. Выявленная нами частота встречаемости антигена А2 в группе крови А и АВ составляет для доноров 0,32%, а для пациентов 3,2%. Выявленное нами соотношение Rh(D)-положительных и Rh(D)-отрицательных лиц среди пациентов составило 94,39 и 5,6% соответственно. Для доноров это соотношение составило 92,43% Rh(D)-положительных и 7,57% Rh(D)-отрицательных (табл. 2).

Полученные нами данные выявили значительно больший процент антигена D вариантного у пациентов. Возможно, это является результатом ослабления антигена D при заболеваниях. Изучение антигенного состава эритроцитов кадровых доноров и пациентов показало, что наиболее распространенным фенотипом среди Rh(D)-положительных лиц является фенотип CCDee-, далее следуют фенотипы CcDee-, CcDEe- и ccDEe- (табл.

3).

Наибольшую опасность представляют в трансфузионном отношении гомозиготные сочетания антигенов системы Резус (СС, сc, ЕЕ и ее), которые встречаются у 86% резус-положительных (D+). Всем донорам и реципиентам независимо от групповой и резус- принадлежности предварительно проводился скрининг на наличие антиэритроцитарных антител. При оценке антиэритроцитарных антител у 13,3% пациентов обнаружены иммунные антитела различной специфичности. В связи с тем, что среди контингента обследованных в лаборатории лиц превалировали беременные, входившие в группу риска по аллоиммунизации, а также больные получившие многократные трансфузии, – индекс сенсибилизации у пациентов оказался высоким. Антитела к антигенам эритроцито системы Резус появляются в организме в результате трансфузий эритроцитов доноров, содержащих антигены, отсутствующие у реципиента, а также при иммунизации матери эритроцитами плода. Частота встречаемости аллоантител к антигенам эритроцитов системы Резус различна и определяется иммуногенностью антигена и частотой встречаемости в популяции.

В 31% случаев антитела не идентифицировали, что связано с сочетанной специфичностью антител или наличием антител к широко распространенным в популяции антигенам. При изучении частоты аллосенсибилизации среди RH(D)-положительных и RH(D)-отрицательных лиц, было обнаружено, что RH(D)-отрицательные люди иммунизируются в 2–2,5 раза чаще, чем RH(D)-положительные. Антитела к минорным антигенам эритроцитов чаще встречаются у резус-положительных лиц, чем у резус-отрицательных. У доноров встречаемость аллоантител составила 0,46% (табл. 4).

Проблема гемолитической болезни новорожденных (ГБН) для города Астана актуальна. Наиболее часто ГБН развивается вследствие конфликта по антигенам системы Резус и АВ0 (табл. 5).

Определение фенотипа по антигенам С, с, Е, е, К

АНМО «Ставропольский краевой клинический консультативно-диагностический центр»:

355017, г. Ставрополь, ул. Ленина 304

(8652) 951-951, (8652) 35-61-49 (факс)

(8652) 951-951, (8652) 31-51-51 (справочная служба)

Посмотреть подробнее

Обособленное подразделение «Диагностический центр на Западном обходе»:

355029 г. Ставрополь, ул. Западный обход, 64

(8652) 951-951, (8652) 31-51-51 (контактный телефон)

(8652) 31-68-89 (факс)

Посмотреть подробнее

Клиника семейного врача:

355017 г. Ставрополь, пр. К. Маркса, 110 (за ЦУМом)

(8652) 951-951, (8652) 31-51-51 (контактный телефон)

(8652) 31-50-60 (регистратура)

Посмотреть подробнее

Невинномысский филиал:

357107, г. Невинномысск, ул. Низяева 1

(86554) 95-777, 96-127, 95-873 (регистратура)

Посмотреть подробнее

Обособленное структурное подразделение в г. Черкесске :

369000, г. Черкесск, пр-т. Ленина, 85А

+7-988-700-81-06 (контактные телефоны)

Посмотреть подробнее

Обособленное структурное подразделение в г. Элисте :

358000, г. Элиста, ул. Республиканская, 47

8(989) 735-42-07 (контактные телефоны)

Посмотреть подробнее

ЗАО «Краевой клинический диагностический центр»:

355017 г. Ставрополь, ул. Ленина 304

(8652) 951-951, (8652) 35-61-49 (факс)

(8652) 951-951, (8652) 31-51-51 (справочная служба)

Посмотреть подробнее

Обособленное структурное подразделение на ул. Доваторцев, 52А:

355037, г. Ставрополь, ул. Доваторцев, 52А

8 (8652) 316-845 (контактный телефон)

Посмотреть подробнее

Обособленное структурное подразделение на ул. Пригородная, 193:

355026, г. Ставрополь, ул. Пригородная, 193

8 (8652) 316-843 (контактный телефон)

Посмотреть подробнее

Обособленное структурное подразделение на ул. Савченко, 38 корп. 9:

355021, г. Ставрополь, ул. Савченко, 38, корп. 9

8 (8652) 316-847 (контактный телефон)

Посмотреть подробнее

Обособленное структурное подразделение на ул. Чехова, 77 :

355000, г. Ставрополь, ул. Чехова, 77

8(8652) 951-943 (контактный телефон)

Посмотреть подробнее

Обособленное структурное подразделение в г. Михайловске:

358000, г. Михайловск, ул. Ленина, 201 (в новом жилом районе «Акварель»).

8(988) 099-15-55 (контактный телефон)

Посмотреть подробнее

Определение фенотипа способствует быстрому генотипированию семейства DFNA2/KCNQ4 с мутацией горячей точки (W276S)

Сравнительное исследование

. 2005 янв; 26 (1): 52-8.

doi: 10.1097/00129492-200501000-00009.

Ведат Топсакал ¹ , Рональд Дж. Э. Пеннингс, Хелеен те Бринке, Бен Хамел, Патрик Л. М. Хьюген, Ханни Кремер, Кор В. Р. Дж. Кремерс

принадлежность

• ¹ Отделение оториноларингологии Медицинского центра Университета Радбауд в Неймегене, Нидерланды.

• PMID: 15699719
• DOI: 10.1097/00129492-200501000-00009

Сравнительное исследование

Ведат Топсакал и др. Отол Нейротол. 2005 Январь

. 2005 янв; 26 (1): 52-8.

doi: 10.1097/00129492-200501000-00009.

Авторы

Ведат Топсакал ¹ , Рональд Дж. Э. Пеннингс, Хелеен те Бринке, Бен Хамель, Патрик Л. М. Хьюген, Ханни Кремер, Кор В. Р. Дж. Кремерс

принадлежность

• ¹ Отделение оториноларингологии Медицинского центра Университета Радбауд в Неймегене, Нидерланды.

• PMID: 15699719
• DOI: 10.1097/00129492-200501000-00009

Абстрактный

Задача: Генотип семейный признак с аутосомно-доминантным несиндромальным сенсоневральным нарушением слуха, определяемый только фенотипом.

Дизайн исследования: Семейное исследование.

Параметр: Третичный реферальный центр.

Пациенты: Пятнадцать членов семьи.

Методы: На первом этапе был проведен анализ последовательности ДНК, выделенной из буккальных мазков пробанда и ее дочери, руководствуясь фенотипом на основе уже имеющихся аудиометрических данных. После обнаружения миссенс-мутации W276S в гене KCNQ4 у обоих пациентов это открытие было подтверждено у других пораженных членов семьи. Все участники заполнили анкету, прошли клиническое обследование и стандартную тональную аудиометрию. Результаты были проанализированы для уточнения фенотипических особенностей семейного признака.

Результаты: Все участники с клиническими проявлениями были носителями мутации W276S в экзоне 5 гена KCNQ4 на хромосоме 1p34. Уточненные фенотипические признаки подтвердили ранее описанные фенотипы семейств DFNA2.

Выводы: Определение фенотипа может быть экономичным и очень эффективным для выявления генотипа аутосомно-доминантного несиндромального нарушения слуха, особенно когда анализ фенотипа может быть выполнен на основе данных, которые уже доступны или легко собираются.

Похожие статьи

• Мутационный очаг в гене KCNQ4, ответственный за аутосомно-доминантное нарушение слуха.

  Ван Кэмп Г., Куке П.Дж., Акита Дж., Франсен Э., Абэ С., Де Линхер Э.М., Хюйген П.Л., Кремерс К.В., Усами С. Ван Кэмп Г. и др. Хум Мутат. 2002 г., июль; 20 (1): 15–9. doi: 10.1002/humu.10096. Хум Мутат. 2002. PMID: 12112653

• Аутосомно-доминантная прогрессирующая нейросенсорная тугоухость из-за новой мутации в гене KCNQ4.

  Арнетт Дж., Эмери С.Б., Ким Т.Б., Берст А.К., Ли К., Лил С.М., Лесперанс М.М. Арнетт Дж. и др. Arch Otolaryngol Head Neck Surg. 2011 Январь; 137 (1): 54-9. doi: 10.1001/archoto.2010.234. Arch Otolaryngol Head Neck Surg. 2011. PMID: 21242547 Бесплатная статья ЧВК.

• Продольный и поперечный анализ фенотипа в новом большом голландском семействе DFNA2/KCNQ4.

  De Leenheer EM, Huygen PL, Coucke PJ, Admiraal RJ, van Camp G, Cremers CW. Де Линхер Э.М. и соавт. Энн Отол Ринол Ларингол. 2002 март; 111 (3 часть 1): 267-74. дои: 10.1177/000348940211100312. Энн Отол Ринол Ларингол. 2002. PMID: 11915881

• Мутации KCNQ4 связаны с несиндромальной прогрессирующей сенсоневральной тугоухостью.

  Ни Л. Ни Л. Curr Opin Otolaryngol Head Neck Surg. 2008 г., 16 октября (5): 441-4. дои: 10.1097/MOO.0b013e32830f4aa3. Curr Opin Otolaryngol Head Neck Surg. 2008. PMID: 18797286 Бесплатная статья ЧВК. Рассмотрение.

• DFNA2 Несиндромальная потеря слуха.

  Смит Р.Дж.Х., Хильдебранд М. Смит Р.Дж.Х. и др. 4 апреля 2008 г. [обновлено 10 мая 2018 г.]. В: Адам MP, Everman DB, Mirzaa GM, Pagon RA, Wallace SE, Bean LJH, Gripp KW, Amemiya A, редакторы. GeneReviews ^® [Интернет]. Сиэтл (Вашингтон): Вашингтонский университет, Сиэтл; 1993–2022. 4 апреля 2008 г. [обновлено 10 мая 2018 г.]. В: Адам MP, Everman DB, Mirzaa GM, Pagon RA, Wallace SE, Bean LJH, Gripp KW, Amemiya A, редакторы. GeneReviews ^® [Интернет]. Сиэтл (Вашингтон): Вашингтонский университет, Сиэтл; 1993–2022 гг. PMID: 20301388 Бесплатные книги и документы. Рассмотрение.

Посмотреть все похожие статьи

Цитируется

• Новая мутация области пор, c.887G > A (p.G296D) в KCNQ4, вызывая потерю слуха в китайской семье с аутосомно-доминантной несиндромальной глухотой 2.

  Хуан Б., Лю Ю., Гао Х., Сюй Дж., Дай П., Чжу К., Юань Ю. Хуанг Б. и др. БМС Мед Жене. 2017 24 марта; 18 (1): 36. doi: 10.1186/s12881-017-0396-5. БМС Мед Жене. 2017. PMID: 28340560 Бесплатная статья ЧВК.

• Диагностический результат секвенирования всего экзома, нацеленного на панель генов нарушений слуха в Нидерландах.

  Зазо Секо К., Весдорп М., Финстра И., Пфундт Р., Хехир-Ква Дж.Ю., Лелиевельд С.Х., Кастелеин С., Гилиссен С., де Вийс И.Дж., Адмирал Р. Дж., Пеннингс Р.Дж., Кунст Х.П., ван де Камп Дж.М., Тамминга С., Хаувелинг А.С., Пломп А.С., Маас С.М., де Конинг Ганс П.А., Кант С.Г., де Геус К.М., Фринтс С.Г., Ванхаутт Э.К., ван Доурен М.Ф., ван ден Бугаард М.Х., Схеффер Х., Нелен М., Кремер Х., Хофслут Л., Шредерс М. , Интема Х.Г. Зазо Секо С. и др. Eur J Hum Genet. 2017 февраля; 25 (3): 308-314. doi: 10.1038/ejhg.2016.182. Epub 2016 21 декабря. Eur J Hum Genet. 2017. PMID: 28000701 Бесплатная статья ЧВК.

• Ассоциация TMTC2 с несиндромальной сенсоневральной тугоухостью человека.

  Рунге С.Л., Индап А., Чжоу И., Кент Дж.В. младший, Кинг Э., Эрбе К.Б., Коул Р., Литтрелл Дж., Мерат К., Джеймс Р., Рюшендорф Ф., Кершнер Дж.Е., Март Г., Хюбнер Н., Геринг Х.Х., Фридланд Д.Р. , Квок В.М., Оливье М. Рунге С.Л. и соавт. JAMA Otolaryngol Head Neck Surg. 1 сентября 2016 г .; 142 (9): 866-72. дои: 10.1001/jamaoto.2016.1444. JAMA Otolaryngol Head Neck Surg. 2016. PMID: 27311106 Бесплатная статья ЧВК.

• Целевое высокопроизводительное секвенирование идентифицирует патогенные мутации в KCNQ4 в двух больших китайских семьях с аутосомно-доминантной тугоухостью.

  Ван Х, Чжао И, И И, Гао И, Лю Ц, Ван Д, Ли Ц, Лань Л, Ли Н, Гуань Дж, Инь З, Хан Б, Чжао Ф, Цзун Л, Сюн В, Ю Л, Сонг Л, Йи С, Ян Л, Петит Си, Ван Ц. Ван Х и др. ПЛОС Один. 12 августа 2014 г.; 9(8):e103133. doi: 10.1371/journal.pone.0103133. Электронная коллекция 2014. ПЛОС Один. 2014. PMID: 25116015 Бесплатная статья ЧВК.

• Генетика потери слуха: фокус на DFNA2.

  Домингес Л.М., Додсон К.М. Домингес Л.М. и соавт. Приложение Clin Genet. 2012 18 октября; 5:97-104. doi: 10.2147/TACG.S35525. Печать 2012. Приложение Clin Genet. 2012. PMID: 23776385 Бесплатная статья ЧВК.

Просмотреть все статьи «Цитируется по»

Типы публикаций

термины MeSH

вещества

Фенотипирование и генотипирование антигенов эритроцитов

Анупам Митра, MBBS, доктор медицины, резидент патологии, PGY2
Sarah Barnhard, MD Медицинский директор службы переливания крови

Основной целью тестирования перед переливанием крови является обеспечение пациента наиболее совместимой кровью, чтобы свести к минимуму риск гемолитических трансфузионных реакций. Тип и скрининг являются первыми двумя тестами, необходимыми в качестве тестирования перед переливанием крови. Как следует из названия, это два теста: «типовой» — для определения группы АВ0 и резус-типа эритроцитов пациента и «скрининговый» — для выявления наличия антител(а) против антигена(ов) эритроцитов. Образование комплекса антитело/антиген зависит от температурного диапазона. Антитела против антигенов эритроцитов оптимально реагируют либо на тепло (при температуре тела или выше), либо на холод (ниже температуры тела) температурные амплитуды. Тепловые антитела обычно приобретаются и относятся к типу IgG. Они реагируют при температуре 37°С или выше. Холодовые антитела обычно встречаются в природе и относятся к типу IgM. Они реагируют ниже 37С. ¹  

1. Что такое фенотипирование эритроцитов?

Фенотип эритроцитов (фенотипирование эритроцитов) относится к определению типа антигенов, присутствующих в эритроцитах. Тип ABO/Rh в «типе и скрининге» проводится у всех пациентов, нуждающихся в переливании крови. Однако также может быть выполнен расширенный антигенный фенотип. Это определяет экспрессию антигена, отличного от антигенов A, B или D. Расширенное фенотипирование антигена эритроцитов почти всегда проводится как рефлекторный тест. То есть расширенное фенотипирование обычно дополняет рутинное тестирование перед трансфузией у пациентов с клинически значимыми аллоантителами или у пациентов с риском образования клинически значимых аллоантител (аллоантител). Четыре варианта панелей расширенного фенотипирования эритроцитов выполняются в лаборатории службы переливания крови – «холодовой фенотип»; «полный теплый фенотип»; «полный фенотип» и «ограниченный фенотип».

Как следует из названия, «холодовой фенотип» представляет собой панель, которая определяет экспрессию всех антигенов с общими соответствующими холодовыми антителами (M, N, P, Lea и Leb). «Полный теплый фенотип» представляет собой панель, определяющую экспрессию всех антигенов с общими клинически значимыми соответствующими антителами, реагирующими на тепловую реакцию (K, E, e, C, c, Fya, Fyb, Jka, Jkb, S и s). . «Полный фенотип» представляет собой панель, которая определяет экспрессию всех антигенов с общими соответствующими антителами, реагирующими либо на тепловую реакцию (K, E, e, C, c, Fya, Fyb, Jka, Jkb, S и s), либо на холодовую реакцию ( М, Н, П, Леа и Леб). В некоторых случаях проводится панель «ограниченного фенотипа» для выявления одного или нескольких специфических антигенов. Фенотипирование эритроцитов всегда выполняется из образца до переливания, чтобы избежать помех от перелитых эритроцитов. ^{2-3 ​​}

1.1 Показания для проведения полного теплового фенотипа на антиген эритроцитов
Полный теплый фенотип можно провести в нескольких различных условиях. ^{2-3 ​​}

1.1.1 Для предотвращения образования антител к эритроцитам — пациенты, получающие хронические трансфузии, неоднократно подвергаются воздействию нескольких чужеродных антигенов эритроцитов в течение длительного периода времени, что увеличивает вероятность образования новых аллоантител. Таким образом, проведение полного теплового фенотипирования перед трансфузиями позволяет лаборатории службы переливания крови предоставить полностью или частично соответствующие фенотипу единицы для этих пациентов, чтобы предотвратить развитие аллоантител(а). Клинические показания для полного теплого фенотипа эритроцитов перед трансфузиями следующие:0003

1. Недавно диагностированная серповидноклеточная анемия
2. Пациентам с серповидноклеточной анемией, у которых ранее не было полного теплового фенотипа, выполнено
3. Другие гемоглобинопатии, зависящие от переливания крови

1.1.2 Для предотвращения дополнительного образования антител к эритроцитам у пациентов с аллоантителами к эритроцитам повышен риск развития других аллоантител, особенно если они подвергаются воздействию более иммуногенных антигенов. Выполнение фенотипирования антигена эритроцитов после выявления аллоантител имеет решающее значение для обеспечения наиболее подходящих трансфузий и предотвращения образования дополнительных антител. Это выполняется либо по полному теплому фенотипу, либо по ограниченному фенотипу на основе пути тестирования рефлексов.

1.1.3 Для подготовки к лекарствам, которые мешают проведению всех анализов. Известно, что у пациентов, получающих анти-CD47 (например, Hu5F9), это лекарство мешает скринингу на антитела к эритроцитам. Полный теплый фенотип проводится перед введением лекарственного средства, чтобы обеспечить трансфузии с соответствующими фенотипами в течение периода введения лекарства, когда новые антитела не могут быть обнаружены, и, таким образом, обеспечить безопасное переливание.

1.2 Показание для проведения холодового фенотипа на антиген эритроцитов
Фенотипирование антигенов эритроцитов пациента, соответствующих обычным антителам, реагирующим на холод, обычно проводят, когда у пациента вырабатываются антитела, реагирующие на холод. Общие сценарии включают анти-М (природное антитело, часто встречающееся у детей) или анти-Льюис (природное антитело, часто встречающееся во время беременности).

1.3 Показания для проведения полного фенотипа антигена эритроцитов
Полный фенотип проводится, когда у пациента имеется несколько антител, реагирующих как на холод, так и на тепло. Это определяет антигенный профиль пациента для антигенов K, E, e, C, c, Fya, Fyb, Jka, Jkb, S, s, M, N, Lea и Leb.

1.4 Индикация выполнения ограниченного антигенного фенотипа
Ограниченный или частичный фенотип определяет один или несколько специфических антигенов эритроцитов вместо полного или полного фенотипа. Это делается в следующих случаях:

1.4.1 Для помощи в исследовании специфичности антител (у пациентов вырабатываются антитела против антигенов, которых у них нет). Если панель антител идентифицирует одно или несколько аллоантител с неясной специфичностью, выполнение ограниченного антигенного фенотипа может помочь определить специфичность антитела(ов).

1.4.2 У любого пациента, выработавшего антитело, лаборатория проводит фенотипирование соответствующего антигена, а также любых более иммуногенных антигенов.

1.4.3 Для оценки риска гемолитической болезни новорожденных. Типирование антигена эритроцитов отца или пуповинной крови определяет экспрессию антигена, которая соответствует материнскому антителу.

1.4.4 Редко выполняется после переливания крови, чтобы определить, является ли восстановление эритроцитов ожидаемым. Определение собственного фенотипа эритроцитов пациента в посттрансфузионных циркулирующих эритроцитах и ​​сравнение его с антигенным типированием до трансфузии может помочь в определении восстановления эритроцитов.

1.5 Сбор проб
Кровь собирают в пробирку с ЭДТА (лиловая верхняя часть). ЭДТА хелатирует кальций и, таким образом, действует как антикоагулянт. Плазма в образце используется для тестирования на антитела, а эритроциты используются для фенотипирования антигена.

1.6 Время и методика анализа
Обычно для тестирования перечисленных панелей фенотипов требуется 1,5–2 часа. Для определения фенотипа некоторых антигенов требуется длительное время инкубации, в то время как другие определяются быстро. Анализы проводят с использованием известных моноклональных или поликлональных антисывороток, инкубированных с эритроцитами пациента. Реактив Кумбса требуется при использовании моноклональных антисывороток на основе IgG для индукции агглютинации и определения наличия антигена.

1.7 Каковы клинические последствия?
У пациентов, которым требуется расширенное соответствие антигенного фенотипа, антигенный профиль любых донорских доз, которым переливают, соответствует ОТРИЦАТЕЛЬНЫМ антигенам в антигенном профиле пациента в дополнение к любым антителам. Если пациенту не проводят хронические трансфузии и одно или несколько антител обнаруживаются впервые, службы переливания крови проведут расширенное антигенное типирование для высокоиммуногенных антигенов и предоставят эритроцитарную массу от донора, у которого отсутствует соответствующий(е) антиген(ы). Это позволит избежать гемолитической трансфузионной реакции и образования новых антител. Если для ухода за пациентом потребуются пожизненные хронические переливания крови, перед всеми переливаниями проводят полное тепловое фенотипирование эритроцитов. Иногда бывает трудно сопоставить отрицательный антигенный профиль, и патологоанатомам службы переливания крови приходится рисковать, разделяя антигены по иммуногенности, чтобы найти наилучшее доступное совпадение. Выполняя это рефлекторное тестирование и получая единицы донорских эритроцитов с расширенным фенотипом, мы предотвращаем гемолиз существующих антител и предотвращаем образование новых антител.

1.8 Ограничения для фенотипирования эритроцитов
Фенотипирование антигена эритроцитов невозможно в определенных ситуациях:

1.8.1 Реакция Кумбса положительна (DAT+). При аутоиммунной гемолитической анемии (АИГА) эритроциты пациента покрыты IgG или IgM, что является аутоиммунным явлением. Присутствие IgG/IgM приводит к ложноположительному тестированию фенотипа, и, таким образом, антигенный профиль не может быть надежно определен.

1.8.2 Пациенту недавно сделали переливание крови. Фенотип антигена эритроцитов выполняется на образце собственных эритроцитов пациента. В условиях недавнего переливания циркулирующие эритроциты состоят из смеси эритроцитов пациента и донора. Таким образом, фенотипирование не будет представлять нативные эритроциты пациента. Клиническая история трансфузии очень важна в этой ситуации.

1.8.3 Эритроциты покрыты лекарственными препаратами и вызывают интерференцию (анти-CD47). Если эритроциты пациента покрыты лекарствами, то антигенный профиль не может быть достоверно определен.

2. Что такое генотипирование эритроцитов?

Как следует из названия, экспрессия антигена эритроцитов также может быть определена с помощью генетического тестирования. Текущее тестирование позволяет выделить геномную ДНК пациента и провести генотипирование антигена эритроцитов, чтобы предсказать фенотип антигена эритроцитов для выбранных антигенов. Это рассылочный тест, который в настоящее время проводится в лабораториях Versiti. Доступны две панели: панель генотипирования эритроцитов (44 антигена) и панель STAT (24 антигена). ⁴

2.1 Показания к определению генотипа антигена эритроцитов —  

1. Антигены эритроцитов пациента не могут быть надежно фенотипированы из-за недавнего переливания крови в анамнезе
2. До приема значительно влияющих препаратов (таких как анти-CD47)
3. Для оценки генетических изменений, таких как частичные антигены, которые могут объяснить наличие аллоантител, но положительное фенотипирование
4. В редких случаях, когда образуются необычные антитела и требуется антигенное профилирование помимо упомянутых общих антигенов.

2.2 Сбор проб
ЭДТА (лавандовый верх) кровь – 5 мл

2.3 Методология и время оборота
аллели, связанные с 44 антигенами групп крови. Для панели STAT 32 зонда ПЦР-гибридизации используются в 16 полимеразных цепных реакциях для идентификации аллелей, связанных с 24 антигенами групп крови.